镇江市食品 茶叶黄曲霉毒素B1检测

黄曲霉毒素b1（aflatoxinb1，简写为afb1），化学式为c17h12o6，纯品为无色结晶，相对分子量为312.27，难溶于水而易溶于油及多种极性有机溶剂，如氯仿、甲醇、乙醇、丙醇、乙二甲基酰胺，不溶于石油醚、乙和己烷。黄曲霉毒素b1在已知的化学物质中致癌力居首位。

　　gb2761-2014《食品安全国家标准食品中真菌霉素的限量》中对于黄曲霉毒素b1的限量以及检测方法做了修改，婴幼儿配方食品及婴幼儿辅助食品按照gb5009.24规定的方法测试，其他食品按照gb/t18979规定的方法测定。

　　薄层色谱法（tlc）tlc法是测定黄曲霉毒素的经典方法，是中国测定食品及饲料中aftb1(afb1)的标准方法之一（gb/t5009.23-2006）。其原理是针对不同的样品，用适宜的提取溶剂将afb1从样品中提取出来，经溶剂萃取纯化，再在薄层板上层析展开，分离，利用afb1的荧光特性，根据荧光斑点的大小和强弱，比较测定黄曲霉毒素含量。tlc有单项展开法和双向展开法，tlc法由于设备简单，易于普及，国内外仍在使用，但由于该法样品前处理繁琐，且提取和净化效果不够理想，提取液中杂质较多在展开时影响斑点的荧光强度，而双向展开虽避免了杂质干扰，增加了灵敏度，但增加了操作步骤和时间。

　　[3]液相色谱法黄曲霉毒素b1高效液相色谱法对黄曲霉毒素b1、b2、g1、g2分别进行定量分析。其主要是用荧光检测器检测，在适宜的流动相条件下，采用反相c18柱，使多种黄曲霉毒素分离。[3]黄曲霉毒素免疫亲和柱hplc法采用单克隆免疫技术，可以地将黄曲霉毒素与其他真菌素分离出来，分离效率和回收率高。此方法已得到广泛应用，并被美国分析化学家协会（aoac）确认为检测方法。该方法的检测限可达0.02~5ppb。

　　酶联免疫法（elisa）酶联免疫法检测afb1的理论基础是抗原反应，其采用单克隆或多克隆技术，具有特异性强、分析时间短等优点。其原理是抗原（或）吸附于载体上的免疫吸附剂和用酶标（或抗原）与标本中的待测物（抗原或）起特异的免疫学反应，用测定酶活力的方法来增加测定的敏感度。大体分为2类：一是用双夹心法检测样本中的aftb1，二是用竞争法检测样本中的aftb1为了使用方便，国内外已研制了酶标记免疫吸附测定试剂盒及配套仪器,方法也被列入国家标准(gb/t5009.22 1996第二法)。[3]但由于elisa法中酶的活性易受反应条件影响，elisa法测定结果稳定性较差，分析结果的准确性不高，容易出现假阳性结果。

　　[4]液相色谱串联质谱法一般来说，组织中黄曲霉毒素含量很低，而液相色谱串联质谱法具有比高效色谱法更高的灵敏度和准确性，如今这种方法还极少使用在测定组织霉菌毒素含量中。该方法检测限可达0.02~0.025ppb。84%甲醇水溶液提取样品中,正己烷脱脂,hlb固相萃取柱净化。采用电喷雾电离,正离子扫描,选择多反应检测模式（mrm）监测,外标法定量，该法灵敏,结果可靠。