本标准适用于以葡萄籽、葡萄皮、沙棘、玫瑰果、蓝浆果、法国松树皮提取物等为主要原料制造的保
健食品中前花青素的测定。
本标准的检测限:方法的检出限(LOD)为1.5X10-4 g/100 g;方法的定量限(LOQ)为5. 0X10-4 g/100g。方法的线性范围为10 μg/mL~ 150 μg/mL。
2原理
前花青素易溶于水是黄烷3-苯儿茶酚和表儿茶精连接而成的。依据试样中前花青素单体或聚合物在加热的酸性条件和铁盐催化作用下,C-C键断裂而生成深红色花青素离子即氰定的原理,使用高效液相色谱,经C反相柱分离,在波长525nm处检测,根据保留时间定性,外标法定量,测定试样中前花青素含量。
3试剂和材料
3.1甲 醇(CH]OH):分析纯。
大|
3.2 甲醇(CH,OF):色谱纯。
3.3 正丁醇[CHQCQH2)2CH2OH]:分析纯
3.4 盐酸(HC) :分析纯。
3.5二氯甲烷(CH2Cl2):分析纯。
3.6 异丙醇[(CHO2QHOH]:分析纯。
3.7 甲酸(HCO0HD分析纯。
3.8 硫酸铁铵[NHPe(SO4)z .12H2O].分析纯。
3.9 水(H2O) :为实验室一级用水,电导率(25 C)为0.01 mS/m。
3.10 2% 硫酸铁铵[NHFeSO,)z●12H2O]溶液:称取硫酸铁铵2 g,用浓度为2 mol/L盐酸溶解,定
容至100 mL。
3.11 前花青素标准品:纯度≥98%.
3.12 前花青素标准溶液(1. 00mg/mL):称取0.01 g前花青素标准品(至0.000 1 g),用甲
醇(3.2)溶解并定容至10mL棕色容量瓶中,此溶液现用现配。